所有栏目

BIOVISION 慢病毒包装试剂盒

2023/11/9

产品编号：BV23001
产品规格：10 次（10cm皿）
产品概述：
远见生物的慢病毒包装试剂盒可以兼容大多数慢病毒表达载体，包装质粒配比经过优化，更低毒性的转染试剂，操作更为安全简单，能够快速高效的收获慢病毒。

试剂盒组成

试剂盒成分	货号	规格	运输温度	保存条件
混合包装质粒	BV23001A-1	400ul(0.5ug/ul)	4℃运输	-20℃
eGFP阳性对照质粒	BV23001A-2	40ul(0.25ug/ul)	4℃运输	-20℃
转染试剂	BV23001A-3	100ul	4℃运输	-20℃
转染试剂buffer	BV23001A-4	5ml	4℃运输	-20℃
增强剂	BV23001A-5	400ul(10mg/ml)	4℃运输	-20℃

实验所需其他实验材料：

1.293T细胞
2.DMEM培养基
3.胎牛血清

4.低内毒素慢病毒质粒

慢病毒包装步骤：

1. 转染前，传代 293T 细胞至 10cm培养皿中，当细胞密度达到80-90%即可转染。
2. 转染前1-3小时，更换10ml 新鲜的完全培养基。

3. 转染，配置转染复合物：

A管（质粒）		B管（转染试剂）
慢病毒质粒	10ug	转染试剂	5ul
混合包装质粒	20ul
转染试剂buffer	250ul	转染试剂buffer	250ul

1) 质粒稀释：取10ug慢病毒质粒，20ul混合包装质粒，用250ul配套Buffer溶液稀释，并轻轻混匀5s。

2) 试剂稀释：使用250ul 配套 Buffer 溶液稀释5ul试剂，并轻轻混匀5s。

3) 复合物配置：将稀释的试剂溶液加入到稀释的质粒溶液中并涡旋25秒左右，然后静置约25分钟，形成复合物纳米粒子（注意涡旋和孵育时间）。

4) 将含复合物纳米粒子的溶液均匀加入到细胞培养皿中，轻微混匀，至于37℃，5%CO2培养箱中培养（无需24 小时更换培养基）。

4. 转染后48-72小时，收取细胞培养液，以2000g离心10分钟或者用0.45um的PES滤器过滤得到慢病毒粗提液。慢病毒粗提液可以直接使用，或者通过BV23001A 慢病毒浓缩试剂进行浓缩。
5. 分装与保存，慢病毒在4℃可以稳定保存约3天，长期保存需分装后保存于-80℃。注意：一次冻融可能会使慢病毒滴度降低50%，尽量避免反复冻融。

BIOVISION 慢病毒包装试剂盒

远见生物科技（上海）有限公司